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农杆菌介导的建兰品种市长红遗传转化体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 周彬 1 ; 曹桦 2 ; 陆琳 2 ; 张钰莹 3 ; 李涵 2 ; 李东徽 1 ;

作者机构： 1.云南农业大学园林园艺学院

2.云南省农业科学院花卉研究所

3.福建省宁德市周宁县林业(花卉)产业发展中心

关键词： 建兰品种市长红;根状茎;农杆菌侵染;遗传转化;绿色荧光蛋白(GFP)

期刊名称： 云南农业大学学报

ISSN： 1004-390X

年卷期： 2025 年 40 卷 007 期

页码： 111-119

收录情况： CSCD

摘要： [目的]探究农杆菌介导的建兰遗传转化体系.[方法]以建兰品种市长红(Cymbidium ensifolium'Shizhanghong')单龙根扩繁得到的根状茎作为试验材料,筛选影响其遗传转化的农杆菌菌株、乙酰丁香酮浓度和抗生素质量浓度,研究影响农杆菌介导建兰遗传转化效率和再生效率的主要因素.[结果]市长红遗传转化的最佳菌株为EHA105,乙酰丁香酮最适浓度为 200 μmol/L,潮霉素最佳质量浓度为 40 mg/L.为保证高转化率和高再生率,市长红的最佳侵染体系为:预培养 10d后,在OD600 值为 0.4~0.6的农杆菌侵染液中振荡 20 min,最后在黑暗条件下共培养 3d.通过筛选的最佳遗传转化条件,经绿色荧光蛋白鉴定、抗生素筛选、PCR和qRT-PCR检测,最终在 180个市长红的根状茎中得到 17株转基因阳性植株,转化率为 9.44%.[结论]本研究建立了农杆菌介导的建兰品种市长红遗传转化体系,为其转基因育种奠定了基础.

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