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百合总蛋白质提取及双向电泳技术体系优化

文献类型： 中文期刊

作者： 张艺萍 1 ; 王继华 1 ; 瞿素萍 1 ; 杨秀梅 1 ; 马璐琳 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院花卉研究所

关键词： 百合;总蛋白提取;双向电泳

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2016 年 14 卷 10 期

页码： 2617-2622

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以百合组培苗叶片为试验材料,研究不同蛋白提取方法的得率、电泳上样量及聚焦除盐时间对双向电泳图谱的影响。结果表明:采用三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法提取百合叶片蛋白质比Tris-HCl法效果好,蛋白得率为38.5 mg/g,且颜色较白,获得的2-DE图谱较好;上样量为600μg时得到的图谱分辨率高、蛋白斑点分布均匀、清晰;等电聚焦(Iso-electrofocusing,IEF)中的2个除盐步骤的时间分别为2 h和2.5 h时,可以较好地去除盐分,顺利完成聚焦并得到较好的双向电泳图谱。该体系的建立将为下一步百合蛋白质组学研究及利用分子育种技术培育抗病品种提供技术资料。

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