文献类型： 中文期刊
作者： 赵珊 1 ; 王继华 2 ; 王丽花 2 ; 杨秀梅 2 ;
作者机构： 1.云南省植物病理重点实验室
2.云南省农业科学院农业部花卉产品质检中心
关键词： 香石竹坏死斑点病毒;RT-PCR;特异引物;简并引物
期刊名称： 西南农业学报
ISSN： 1001-4829
年卷期： 2010 年 23 卷 01 期
页码： 103-106
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 调查表明云南省昆明市团结乡香石竹普遍发生病毒病。电镜负染检测采自团结乡香石竹病毒病病样,病叶汁液中观察到弯曲长线型的病毒粒体,长度约1000~1600 nm,直径约12 nm。对这些病样的叶片进行间接ELISA检测,所有样品与香石竹坏死斑点病毒抗血清都呈阳性反应。按照报道的长线形病毒属简并引物合成引物,采用RT-PCR法对血清反应呈阳性的香石竹总RNA扩增了1059ntsHSP70基因部分编码序列,将其克隆到pMD18-T载体上,并进行序列分析。根据测序结果设计引物建立RT-PCR扩增检测方法并测定其灵敏度。结果表明,使用简并引物和新设计的引物均能从CNFV感病香石竹组织中扩增出与预期大小一致的目标片段,而健康组织无此扩增产物。灵敏性测定结果表明该特异性引物RT-PCR可从稀释106植物总RNA中检测出病毒。
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