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滇龙胆GrCMS基因的克隆与表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张晓东 1 ; 李彩霞 2 ; 王元忠 2 ;

作者机构： 1.北京农业生物技术研究中心

2.云南省农业科学院药用植物研究所

关键词： 滇龙胆;2-C-甲基-D-赤藓醇4-磷酸胞苷酰转移酶;基因克隆;表达分析

期刊名称： 植物研究

ISSN： 1673-5102

年卷期： 2016 年 36 卷 02 期

页码： 258-265

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 2-C-甲基-D-赤藓醇4-磷酸胞苷酰转移酶是赤藓糖磷酸酯(MEP)途径中的第三个催化酶。以滇龙胆转录组为基础,采用RT-PCR技术从滇龙胆幼叶克隆2-C-甲基-D-赤藓醇4-磷酸胞苷酰转移酶基因GrCMS,并进行原核表达和组织特异性表达分析。序列分析显示,GrCMS基因(登录号KJ917164)开放阅读框(ORF)长933 bp,编码310氨基酸,推测分子量为34.23 kD,等电点为7.68。蛋白质序列分析显示,GrCMS无信号肽,为亲水稳定蛋白,主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,可能定位叶绿体;具有CMS保守结构域。进化分析结果表明,GrCMS蛋白与长春花CrCMS蛋白亲缘关系最近。原核表达结果表明,GrCMS与预期蛋白大小一致。定量PCR结果表明,GrCMS基因主要在叶中表达。结果为进一步研究该基因功能和龙胆苦苷生物合成途径奠定基础。

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