文献类型： 中文期刊
作者： 潘慧 1 ; 赵忠豪 1 ; 章松柏 1 ; 张德咏 1 ; 张洁 1 ; 李俊凯 1 ; 郑立敏 1 ;
作者机构： 1.长江大学农学院;湖南省农业科学院植物保护研究所;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
关键词： 番茄斑萎病毒;N蛋白;Gn蛋白;多克隆抗体
期刊名称： 福建农业学报
ISSN： 1008-0384
年卷期： 2018 年 09 期
页码： 963-968
收录情况： 北大核心
摘要： 由番茄斑萎病毒Tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV)侵染引起的番茄斑萎病毒病在我国蔬菜、花卉等作物上造成了严重的经济损失。本研究克隆了TSWV核衣蛋白N基因及膜多糖蛋白Gn基因,利用Gateway系统获得N和Gn基因的原核表达载体。将其转化到大肠杆菌表达菌株Rosetta (DE3)细胞内,IPTG诱导表达N蛋白和Gn蛋白,以此为抗原分别免疫新西兰大白兔,制备N蛋白和Gn蛋白的多克隆抗体。Western blot检测结果表明,N蛋白的多克隆抗体能够与N蛋白发生特异性结合反应,间接酶联免疫吸附(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,in-ELISA)分析检测表明抗体滴度为1∶12 800,而Gn蛋白的多克隆抗体特异性差,效价未检出。本研究制备的N蛋白多克隆抗体可用于田间病株的病害诊断,同时有助于开展病毒在介体昆虫内定位、病毒和介体昆虫互作及功能分析的研究。
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