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滇龙胆GrSLS1基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 张晓东 1 ; 李彩霞 1 ; 王连春 1 ; 李涛 1 ; 王元忠 2 ;

作者机构： 1.玉溪师范学院资源环境学院

2.云南省农业科学院药用植物研究所

关键词： 滇龙胆;GrSLS1基因;基因克隆;序列分析;原核表达

期刊名称： 西北植物学报

ISSN： 1000-4025

年卷期： 2014 年 34 卷 07 期

页码： 1311-1317

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以滇龙胆转录组为基础,采用RT-PCR技术克隆了滇龙胆幼叶裂环番木鳖苷合酶基因,命名为GrSLS1(GenBank登录号KF941191)。序列分析结果显示,GrSLS1基因开放阅读框长1 560bp,编码519个氨基酸;GrSLS1蛋白相对分子量为59.33kD,pI为8.96。生物信息学分析结果表明,GrSLS1蛋白属于SLS家族成员,其N端含有一跨膜螺旋区域(10~32);二级结构分析结果表明,GrSLS1蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成;系统发育分析表明,GrSLS1与帽柱木MsSLS2蛋白亲缘关系最近。构建原核表达载体pGEX-4T-GrSLS1,对GrSLS1基因进行原核表达,SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。该研究为进一步研究GrSLS1基因功能及通过在龙胆中过表达该基因提高龙胆苦苷含量奠定基础。

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