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滇龙胆GrHMA基因的克隆和原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王彩云 1 ; 李富生 1 ; 李涛 1 ; 李彩霞 1 ; 张晓东 1 ; 王元忠 1 ;

作者机构： 1.云南农业大学农学与生物技术学院;玉溪师范学院资源与环境学院;云南省农业科学院药用植物研究所

关键词： 滇龙胆;GrHMA基因;克隆;原核表达

期刊名称： 生命科学研究

ISSN： 1007-7847

年卷期： 2014 年 18 卷 03 期

页码： 211-217

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： HMA蛋白(heavy metal transporting ATPase)是一种在植物中广泛存在的多功能蛋白。根据滇龙胆转录组GrHMA基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增GrHMA基因序列,并进行TA克隆、测序及序列分析;构建原核表达载体pGEX-4T-1-GrHMA,转入E.coli Rosetta(DE3)中,并在37℃、1.0 mmol/L IPTG下成功诱导表达。序列分析表明,GrHMA基因是HMA超家族的成员;GrHMA氨基酸序列系统发育分析表明,GrHMA与TcHMA处于同一进化枝。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。这些结果为GrHMA蛋白的进一步纯化及结构和功能的研究奠定基础。

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