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一种烟草花叶型病毒的快速灵敏检测方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 云南省烟草农业科学研究院;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

发明人: 秦西云;丁铭;卢训;张仲凯;方敦煌;李婷婷;方琦

专利号: CN201410034604.8

摘要: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应,专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法,检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。

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