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一种诱导烟草疫霉产生致病性分泌蛋白的方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 红云红河烟草(集团)有限责任公司;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

发明人: 罗华元;常寿荣;王绍坤;徐洁;周晓罡

专利号: CN201110255064.2

摘要: 本发明涉及一种诱导烟草疫霉产生致病性分泌蛋白的方法。其方法是将烟草黑胫病样带回实验室,用自来水冲洗干净病株茎秆表面。待风干后从病健交界处取0.4cm×0.4cm髓部组织块置于燕麦培养基,置于28℃黑暗条件下培养3~4天,形成较大的菌落后,将菌丝块转接到300mL分泌蛋白液体诱导培养基中,于28℃,120rpm振荡培养2周,用双层灭菌滤纸滤去菌丝体,滤液经5000rpm离心10min,上清液加入硫酸铵,10000rpm离心20min,沉淀经透析处理,冻干后获得烟草疫霉的分泌蛋白,-20℃保存。此方法可以诱导烟草疫霉菌大量产生致病性分泌蛋白,填补了国内外烟草疫霉致病机理研究中不能获得分泌蛋白的空白,具有重大意义。

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