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一种玉米醇溶蛋白基因RNAi载体的构建方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 云南省农业科学院粮食作物研究所;云南田瑞种业有限公司

发明人： 陈威;番兴明;刘丽;王琨

专利号： CN201210010542.8

摘要： 本发明公开了一种玉米醇溶蛋白基因RNAi载体的构建方法。该方法以pUC19为骨架载体，构建插入正向目的片段和胚乳特异性表达启动子P-zp22/6的重组载体，构建插入反向目的片段和终止子poly(A)的重组载体，将两重组载体分别酶切、连接得到重组载体pUC19-p22/6-22KD1-22KD2-poly(A)；再将GUS基因内含子插入到该重组载体，得到玉米醇溶蛋白基因RNAi载体，目的片段是22-KD醇溶蛋白基因部分cDNA片段。用相同方法构建了另一个玉米醇溶蛋白基因RNAi载体，目的片段为19-KD醇溶蛋白基因部分cDNA片段。该方法缩短了载体构建的时间，能成功获得高赖氨酸含量的转基因植株。

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