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中甸刺玫及其近缘种基于FISH的核型分析
《园艺学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了解中甸刺玫(Rosa praelucens Byhouwer)异源十倍体的起源,以中甸刺玫及与其同域分布的20个蔷薇属近缘种为研究材料,以45S rDNA和5S rDNA为探针,采用双色荧光原位杂交(FISH)技术研究其核型。(1)21种蔷薇中只有中甸刺玫的核型为2B,其他种的核型均为2A。(2)细胞分裂间期除拟木香的45SrDNA杂交位点与倍性不一致外,其他20种蔷薇的45SrDNA位点数与倍性相同;细胞分裂中期所有蔷薇的45S rDNA杂交位点数都与倍性相同;细梗蔷薇、峨眉蔷薇、绢毛蔷薇、毛叶蔷薇、钝叶蔷薇、西北蔷薇、拟木香、全针蔷薇、大叶蔷薇、刺蔷薇、华西蔷薇、橘黄香水月季、刺梨、中甸刺玫等14种蔷薇的45S rDNA有脆性位点。(3)5S rDNA杂交位点的数量和位置在蔷薇属中不确定,多腺小叶蔷薇、橘黄香水月季、卵果蔷薇、复伞房蔷薇、川滇蔷薇这5个二倍体蔷薇的细胞分裂间期和中期都有4个5S rDNA杂交位点,西北蔷薇和拟木香这两个二倍体蔷薇的间期有4个5S rDNA杂交位点,中期有2个杂交位点,其他14种蔷薇的间期和中期5S rDNA杂交位点数与倍性一致。上述结果表明,45S rDNA和5SrDNA的FISH能准确地定位蔷薇属植物的部分染色体,使核型分析结果更加精确。根据中甸刺玫及其近缘种的核型特征,推测中甸刺玫的原始亲本可能是细梗蔷薇、华西蔷薇和西南蔷薇。
关键词： 蔷薇属 中甸刺玫 FISH 45S rDNA 5S rDNA 杂交起源 核型分析
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中甸刺玫的系统位置及杂交起源研究
《植物遗传资源学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：中甸刺玫(Rosa praelucens Byhouwer)是云南特有的高山花卉和耐低温的月季种质资源,也是蔷薇属唯一有报道的10倍体的野生种。然而,中甸刺玫的系统位置存在较大争议,其起源也不清楚。本研究利用5S rDNA和4个叶绿体DNA(cpDNA)片段(psbA-atpH、rbcL、rpl16和trnL-F)来构建蔷薇属的系统关系,明确中甸刺玫的系统位置;通过与近缘物种的序列比对,推测中甸刺玫的原始亲本。结果表明:蔷薇属50个种(变种)的5S rDNA序列长度为498~573 bp,变异程度随物种表现出明显差异。cpDNA片段中psbA-trnH变异较大,4个片段联合分析的矩阵长2969 bp,其中变异位点153个。基于5S rDNA的分子系统树和4个cpDNA片段联合分析的分子系统树中,中甸刺玫均与桂味组的物种聚在一起,与小叶组的刺梨亲缘关系较远,其系统位置应从小叶组移至桂味组。中甸刺玫的十倍体起源很复杂,细梗蔷薇、华西蔷薇、尾萼蔷薇、西南蔷薇和西北蔷薇是与其关系最近的野生近缘种,其原始母本最可能是尾萼蔷薇、西南蔷薇和西北蔷薇的其中之一或共同母本,细梗蔷薇和华西蔷薇极可能是其父本,而尾萼蔷薇、西南蔷薇和西北蔷薇也可能以父本的身份参与了中甸刺玫的杂交物种形成。
关键词： 中甸刺玫 蔷薇属 5S r DNA cp DNA 系统位置 杂交起源
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荧光原位杂交技术在蔷薇属植物研究中的应用综述
《江苏农业科学 》 2018 北大核心
摘要：荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术,具有试验周期短、灵敏度高、分辨率高、直观可见等优点。常规的荧光原位杂交方法已在很多植物中普遍应用,但对蔷薇属(Rosa L.)植物的研究较少,主要集中在45S rDNA和5S rDNA的基因定位与染色体同源性分析上。本文对蔷薇属植物的FISH研究进行总结和描述,并对其在蔷薇属植物分子细胞遗传学研究中的应用前景作了展望。
关键词： 荧光原位杂交 蔷薇属 45S rDNA 5S rDNA 基因定位 同源染色体
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蔷薇属3个野生种中45S rDNA和5S rDNA的物理定位
《园艺学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用双色荧光原位杂交(FISH)技术对3个二倍体蔷薇野生种:多苞蔷薇(Rosa multibracteata Helm.et Wils.)、川滇蔷薇(R.soulieana Crép.)和金樱子(R.laevigata Michx.)的体细胞中期染色体进行了45S rDNA和5S rDNA物理定位。结果表明:45S rDNA在这3种蔷薇的染色体上的数量和分布模式较一致,都有1对位点,均位于一对亚中部着丝点异形同源染色体的短臂上。5S rDNA在多苞蔷薇上有1对位点,在川滇蔷薇和金樱子上各有2对位点,都分布于染色体长臂的近着丝点处。这3种蔷薇各自的rDNA位点数量、所在染色体和信号强弱有明显差异。研究结果为识别3种蔷薇各自的染色体提供了明确有效的分子细胞遗传学标记。
关键词： 蔷薇属 rDNA 荧光原位杂交(FISH) 核型
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45S rDNA在中国古老月季品种染色体上的荧光原位杂交分析
《云南农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用荧光原位杂交(FISH)技术研究45S rDNA在10个中国古老月季品种染色体上的差异.结果表明:(1)中国古老月季品种的45S rDNA杂交位点数与染色体倍性变化基本一致,中国古老月季的起源可能比较简单:二倍体的‘月月红’、‘月月粉’和‘绿萼’均有2个45S rDNA杂交位点,三倍体的‘湖中月’、‘青莲学士’和‘春水绿波’有3个45S rDNA杂交位点,四倍体品种除‘大富贵’有3个杂交位点外其他都有4个45S rDNA杂交位点;(2)中国古老月季品种之间在45S rDNA杂交信号的强弱上存在差异,说明中国古老月季品种之间在染色体结构及45S rDNA拷贝数上存在多样性.
关键词： 蔷薇属 荧光原位杂文(FISH) 45S rDNA 中国古老月季
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月季丁香酚合成酶基因RhEGS1的克隆及表达分析
《中国农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆月季丁香酚合成酶基因RhEGS1的全长cDNA序列,分析其序列及表达特征,并对该基因编码的蛋白进行原核表达分析,为深入探讨丁香酚合成酶的生化特性奠定基础。【方法】根据已发表的其它植物EGS基因序列的保守结构域设计简并引物,结合RACE技术,获得RhEGS1的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用半定量RT-PCR对不同组织及不同花发育时期RhEGS1进行表达分析。采用Gateway克隆技术,构建原核表达载体,并进行原核蛋白表达。【结果】月季RhEGS1的cDNA全长为1 207 bp,包含一个927 bp的ORF,编码309个氨基酸。同源序列比对发现RhEGS1与仙女扇的CbEGS2有83.87%的同源性,与矮牵牛PhEGS1具有81.55%同源性。表达谱分析表明,RhEGS1主要在雄蕊中表达,且在花盛开期表达最强,而在花蕾期及凋谢期表达较弱。原核表达分析发现,在37℃、0.5 mmol.L-1IPTG诱导4 h后,携带RhEGS1 ORF的原核表达载体在大肠杆菌中生成了大量的分子量约为35 kD的蛋白质,其分子量大小与预测的理论值相一致。【结论】从月季雄蕊中克隆到丁香酚合成酶基因RhEGS1,具有EGS基因的结构特征和完整的编码框,且在盛开期雄蕊中表达量最高。
关键词： 月季 丁香酚合成酶基因 RT-PCR Gateway克隆 原核表达
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野蔷薇(Rosa multiflora)抗白粉病基因RmMlo的克隆与表达分析
《园艺学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以野蔷薇(Rosa multiflora)为试材,采用RT-PCR和RACE方法从叶片中获得了一个Mlo同源基因的cDNA全长,命名为RmMlo,GenBank登录号为JF310747。序列分析结果表明,RmMlo基因cDNA全长为1993bp,包含49bp的5′非编码区、243bp的3′非编码区和一个长度为1700bp编码567个氨基酸的开放阅读框。氨基酸序列分析显示其蛋白质的C末端具有两个保守的MLO模体。序列比对和系统进化分析表明,RmMlo与拟南芥等双子叶植物的Mlo亲缘关系较近,相似性达90%以上。半定量RT-PCR分析表明,RmMlo在感病叶片中的表达量最高,在根中不表达,其表达模式与拟南芥的AtMlo有一定差别。
关键词： 野蔷薇 月季 白粉病 Mlo基因 克隆 组织特异性表达
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云南复伞房蔷薇天然居群表型多样性的居群生物学分析
《云南农业大学学报(自然科学版) 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：应用居群生物学的原理和方法,对分布于云南的6个复伞房蔷薇(Rosa brunoniiLindl.)天然居群的15个表型性状进行多样性分析。结果表明,复伞房蔷薇表型性状在群体间和群体内均存在丰富的变异,15个性状群体间的F值为2.29~7.71,除花瓣宽不显著外,其余14个表型性状均达到极显著或显著水平;15个性状群体内的F值为1.21~11.04,除花萼长和宽不显著外,其余性状均达到极显著水平。15个性状群体平均表型分化系数为33.14%,群体内变异(31.27%)大于群体间变异(13.98%),说明群体内变异是复伞房蔷薇的主要变异来源。复伞房蔷薇刺数量与纬度呈显著正相关,中部和顶端的小叶长与宽与纬度呈显著负相关,叶柄长与海拔呈显著负相关,其它性状与地理因子的相关性均不显著。利用群体间欧氏距离进行UPGMA聚类分析的结果表明,6个天然群体可以划分为两类。依据研究结果,复伞房蔷薇的遗传改良策略应当是:适当地减少抽样居群数,增加居群内的家系数,即应重视群体内优良单株的选择。种质资源的保护策略应当是:尽量保护一个居群的完整性。
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中国古老月季品种的核型研究
《园艺学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：采用常规压片法对‘月月红’等11个中国古老月季品种进行了以染色体形态和倍性为主的核型分析研究。结果表明:(1)不同品种的染色体数差异较大,‘绿萼’、‘玉玲珑’、‘月月红’和‘月月粉’是二倍体(2n=2x=14);‘春水绿波’和‘湖中月’是三倍体(2n=3x=21),‘大富贵’、‘金粉莲’、‘菊红潮’、‘映日荷花’和‘思春’是四倍体(2n=4x=28)。(2)11个品种染色体的绝对长度均在1～3μm之间;品种间核不对称系数变化范围为56.560%～60.376%;除‘思春’和‘映日荷花’外,其它9个品种中均未观察到随体存在。(3)‘春水绿波’和‘湖中月’的核型公式为2n=3x=21=3sm+18m,核型类型均是1A;‘金粉莲’和‘菊红潮’的核型公式为2n=4x=28=4sm+24m,‘大富贵’的核型公式为2n=4x=28=2sm+26m,核型类型都是1A;‘绿萼’的核型公式是2n=2x=14=2sm+12m,核型类型为1B;‘思春’和‘映日荷花’的核型公式是2n=4x=28=4sm+22m+2m(SAT),核型类型为1A;‘玉玲珑’的核型公式是2n=2x=14=2sm+12m,核型类型为1A;‘月月粉’和‘月月红’的核型公式是2n=2x=4sm+10m,核型类型为2A。
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