通过农杆菌介导把Harpin_(Ea)基因导入马铃薯的初步研究

李先平; 何云昆; 赵志坚; 李树莲; 《中国马铃薯 》 2002

摘要：应用农杆菌介导的叶盘法进行马铃薯遗传转化研究。通过D3、D4培养基筛选法 ,把HarpinEa蛋白基因导入马铃薯四倍体栽培种大西洋 (Atlantic) ,获得 10 7个转化株系。并经过卡那霉素的抗性鉴定和PCR分子检测 ,有 5 9株PCR检测呈阳性 ,占所有转化植株的 5 5 14%。结果表明HarpinEa基因已整合到马铃薯的基因组中。转化植株的抗病性鉴定正在进行中。

关键词： HarpinEa基因 马铃薯晚疫病 转基因植株

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表达Harpin_(Ea)基因的转基因马铃薯的晚疫病抗性分析

李先平; 何云昆; 陈善娜; 赵志坚; 李树莲; 李汝刚; 《云南农业大学学报 》 2002 CSCD

摘要：通过根癌农杆菌介导 ,用HarpinEa基因转化马铃薯四倍体栽培种大西洋 (Atlantic) ,获得 10 7个马铃薯转化株系。经过卡那霉素的抗性鉴定和PCR分子检测 ,有 5 9株PCR检测成阳性 ,占所有转化植株的 5 5 14 % .实验对部分转基因植株进行室内抗病性评价 ,从 2 4个PCR阳性株系中筛选到 9个株系的抗病性与对照相比有显著差异 (P <0 0 5 ) ,其中 7株的抗病性与对照相比差异极显著 (P <0 0 0 1)。结果初步表明HarpinEa基因已整合到马铃薯的基因组中并得到表达 ,提高了植株的晚疫病抗性。

关键词： HarpinEa基因 马铃薯晚疫病 转基因植株

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云南省马铃薯晚疫病菌交配型分布及发生频率

赵志坚; 王淑芬; 李成云; 李先平; 何云昆; 《西南农业学报 》 2001 CSCD

摘要：1998～ 1999年 ,将云南省不同类型马铃薯主要种植区内 12个马铃薯产区分离的大量晚疫病菌菌株与A1和A2交配型标准菌株进行了交配型测定。结果表明 :2 5 3个晚疫病菌株中 ,A1交配型有 2 0 4株 ,仍为优势侵染病原 ,分布于所有马铃薯产区 ;A2交配型菌株 4 1株 ,发生频率为 16 2 %,除昭通、沾益、嵩明、寻甸和大理外 ,其余 7个产区均有分布。 8个自育型菌株被检测到 ,对其形态特征及有性结构分别进行了描述。本文还讨论了A2交配型的扩散对云南省马铃薯生产造成的潜在威胁 ,并据此提出了对种薯调运的一些建议。

关键词： 马铃薯 晚疫病菌 交配型 云南

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云南省马铃薯病毒主要病原研究进展

赵志坚; 何云昆; 《中国马铃薯 》 2001

摘要：晚疫病、青枯病、软腐病和病毒病等是常年危害云南省马铃薯生产的主要病害,每年均引起十分严重的损失,以前对这些病害病原菌的诸多方面缺乏详细的了解,该文论述了马铃薯主要病害病原菌的生物学特性、群体组成、分布范围、发生频率等内容研究取得的一些进展.可为云南马铃薯抗病品种的选育、种质资源筛选与评价以及病害综合防治策略的合理制定提供理论依据.

关键词： 马铃薯 病害 病原菌 云南省

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马铃薯抗晚疫病育种研究进展

李先平; 何云昆; 赵志坚; 孙茂林; 隋启君; 《中国马铃薯 》 2001

摘要：文章概述了近一个世纪以来马铃薯抗晚疫病育种的研究进展。对马铃薯晚疫病的传播与危害、马铃薯抗晚疫病育种的历史、马铃薯的抗病机制和抗病基因克隆等作了综述 ,并介绍和评述了各种生物学技术在引进和创造马铃薯抗病资源中的应用

关键词： 马铃薯育种 晚疫病

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云南省马铃薯病害主要病原研究进展

赵志坚; 何云昆; 隋启君; 《中国马铃薯 》 2001

摘要：晚疫病、青枯病、软腐病和病毒病等是常年危害云南省马铃薯生产的主要病害 ,每年均引起十分严重的损失。以前对这些病害病原菌的诸多方面缺乏详细的了解。本文论述了马铃薯主要病害病原菌的生物学特性、群体组成、分布范围、发生频率等内容研究取得的一些进展。可为云南马铃薯抗病品种的选育、种质资源筛选与评价以及病害综合防治策略的合理制定提供理论依据

关键词： 马铃薯 病害 病原菌 云南省

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云南马铃薯细菌性软腐病原菌的分离鉴定

赵志坚; 王淑芬; 方琦; 李先平; 何云昆; 《云南农业大学学报 》 2000 CSCD

摘要：从云南省马铃薯产区取样 ,用厌气技术分离纯化了 42个软腐欧文氏杆菌菌株。根据品种差异代表性地选出2 0个菌株进行主要细菌学性状鉴定 ,并在此基础上进行分类。结果表明 :13个菌株 (占 6 5 % )是Erwiniacarotovo ravar.carotovora ,3个菌株 (15 % )是Erwiniachrysanthemi ,其它 4个菌株根据其生理生化特性划归为中间型 ,介于Erwiniacarotovoravar.carotovora和Erwiniachrysanthemi之间。

关键词： 马铃薯 细菌性软腐病 欧氏杆菌

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马铃薯RAPD分析方法优化初探

李先平; 何云昆; 孙茂林; 李云海; 邓纪新; 赵志坚; 《西南农业学报 》 2000 CSCD

摘要：以云南马铃薯主要栽培品种为材料 ,使用进口PCR仪 ,对马铃薯RAPD分析中的DNA模板浓度、引物浓度、dNTP浓度以及PCR扩增反应循环次数进行了研究。结果表明适用于马铃薯RAPD反应的最佳条件为 :模板DNA1 5～ 5 0ng ,1 0 mer随机引物 2 5～ 5 0ng ,dNTP2 0 0 μM ,扩增反应周期 40～ 45个循环。每个循环包括 94℃变性 1min ,37℃退火 1min ,72℃延伸 2min。使用这一RAPD程序对云南的主要栽培品种进行品种鉴别 ,能有效区分出所有参试品种 ,检测出品种CFK6 9 1遗传背景特殊 ,较之于普通栽培品种亲缘关系较远。本实验建立了适宜马铃薯RAPD分析的PCR程序及条件 ,为RAPD应用于马铃薯的遗传研究打下了基础。

关键词： 马铃薯 RAPD

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云南省发现马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)A2交配型

赵志坚; 何云昆; 李成云; 张志铭; 朱杰华; 李先平; 邓纪新; 《西南农业学报 》 1999 北大核心 CSCD

摘要：将一批分离自楚雄、大理、昆明、曲靖、宣威等马铃薯产区的晚疫病菌在利马豆 Ｖ８ 琼脂培养基上与 Ａ１ 交配型标准菌株进行交配型测定， ４７ 个菌株中出现了１０ 个 Ａ２ 交配型菌株。亲和性菌株交配时产生大量具有典型特征的有性结构。对卵孢子、穿雄生的藏卵器以及雄器的形态特征和大小进行了描述。这是云南马铃薯晚疫病菌中存在 Ａ２ 交配型菌株的首次报道。

关键词： 马铃薯 晚疫病菌 A2交配型

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马铃薯晚疫病菌A2交配型的发生及其危害

赵志坚; 何云昆; 《云南农业科技 》 1999

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