云南城乡楼顶绿色微农场构建初探

刘文安; 刘彦坤; 马继琼; 《云南农业 》 2023

摘要：为了探索云南省低纬高原地区城乡平顶房楼顶空间的利用途径,将永平县蔬菜种植、养鱼、养蜂、养鸡等传统农耕习作内容引入楼顶利用,构建了包括菜地、鱼池、蜂箱、鸡舍、化粪池、太阳能热水器等设施构成而具地方特色的楼顶绿色生态微农场.将家庭剩菜剩饭和产生的废弃菜叶作为鸡、鱼饲料来源,自然降水作为鱼池和种植蔬菜的主要水源,经发酵的鸡粪和鱼池泥作为蔬菜种植的肥料来源,2021年实现了蔬菜、鸡、鱼、蜂蜜等无公害食品的部分自给,每年节省生活开支5 068.6元.夏天具有微农场的顶楼房间温度比普通楼房低0.9℃,改善了顶楼居室的居住体验,同时美化了住宅,节约了耕地,经济效益和生态效益显著.结果将为云南城镇和农村平顶房楼顶空间利用提供了成功范例.

关键词： 平房楼顶 种植养殖 绿色食品 家庭微农场

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云南人喜食的菜食花——杜鹃花

马继琼; 《云南农业科技 》 2022

摘要：学名:云南盛产杜鹃花,菜食的主要有下列5个种,即大白杜鹃(Rhododendron decorum Franch.)、滇南杜鹃(Rhododendron hancockii Hemsl.)、睫毛萼杜鹃(Rhododendron ciliicalyx Franch.)、云上杜鹃(Rhododendron pachypodum Balf. f. et W. W.Smith)、尖叶美容杜鹃(Rhododendron calophytum Franch.var.openshawianum),均属于杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃属(Rhododendron)。

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水稻化感抗(耐)稗草相关转录因子OsMYB57的靶蛋白筛选

张翠; 马继琼; 杨奕; 许明辉; 孙一丁; 郭怡卿; 《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：[目的]揭示水稻化感抗(耐)稗草的转录调控机制,为遗传修饰改良水稻化感性状做铺垫,也为杂草的防控提供新途径.[方法]利用SMART技术,通过同源重组方式,在Y2H菌株中构建水稻受稗草胁迫的酵母cDNA文库;利用限制性内切酶BamHⅠ和NdeⅠ构建OsMYB57 C端缺失的pGBK-OsMYB57诱饵载体,按照YeastmakerTM Yeast Transformation System 2操作检测诱饵自激活活性;用酵母双杂交技术筛选OsMYB57互作蛋白,将所得互作蛋白的编码序列构建至pGAD载体,并与诱饵载体共转化Y2HGold菌株验证蛋白互作,再以BiFC技术进一步验证蛋白间的互作.[结果]酵母cDNA文库库容量为1.36×107 CFU/mL,插入片段在250~2000 bp,平均长度大于1000 bp,重组率为100%,库容量大且质量良好;筛选出4个有注释的互作蛋白,分别是16号RZFP34、50号4HTR、51号BM1PD和74号GTP1;回转验证及BiFC结果显示RZFP34、4HTR、BMIPD、GTP1与OsMYB57在植物细胞中相互作用,其中RZFP34是一个E3亚型泛素连接酶,在植物中响应非生物逆境胁迫应答,且水稻OsRZFP34基因启动子区含有与水稻化感调控有关的水杨酸和茉莉酸等激素响应及MYB转录因子结合域相关元件.[结论]RZFP34通过与OsMYB57互作参与水稻化感转录调控而发挥作用.

关键词： 水稻;稗草;互作;化感抗(耐)性;OsMYB57;酵母双杂交

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云南人喜食的菜食花-杜鹃花

马继琼; 《云南农业科技 》 2022

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水稻酵母双杂交文库构建及PID2胞内结构域互作蛋白的筛选

孙一丁; 杨奕; 刘畅媛; 马继琼; 许明辉; 《分子植物育种 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：为了进一步挖掘水稻PID2胞内互作蛋白质，阐明Pid2介导的稻瘟病抗性机制。本研究利用SMART技术，构建了受稻瘟病诱导后不同时间段的含抗性基因Pid2水稻材料的cDNA文库；通过PCR扩增获得PID2胞内结构域编码片段Pid2-JM，构建了诱饵表达载体pGBK-Pid2-JM，并进一步利用酵母双杂交技术筛选Pid2-JM的互作蛋白。结果表明，构建的cDNA酵母文库细胞密度为9.0×10~7Cells/mL，文库插入片段在500～2 000 bp之间，重组率为100%，诱饵载体无自激活活性；利用诱饵载体经筛选文库后，新发现一个能与Pid2-JM互作的U-box类E3泛素连接酶PBP1，经回转试验验证了PBP1与Pid2-JM可在烟草细胞内互作。综上，本研究成功构建了稻瘟病诱导下的水稻酵母双杂交文库，并筛选到一个能与PID2胞内结构域互作的U-box类E3泛素连接酶，该结果为进一步揭示水稻抗稻瘟病信号转导机制提供参考。

关键词： 稻瘟病 酵母双杂交 Pid2 互作蛋白 E3泛素化连接酶

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稻瘟病抗性对根际土壤微生物多样性的影响

张翠; 孙一丁; 马继琼; 杨奕; 郭怡卿; 李进斌; 许明辉; 《生态科学 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：为了解稻瘟病抗性与根际土壤微生物之间的关系,在云南宜良大田条件下对6个稻瘟病单基因系Piz、Pib、Pikh、Pi19、Pi3、Pita和受体"丽江新团黑谷"(LTH)进行了诱发鉴定,利用ITS1和16S rDNA高通量测序技术对土壤根际真菌的ITS1序列以及细菌16S rDNA区片段进行了分析.结果显示单基因系Piz、Pib、Pikh表现抗病,Pi19、Pi3、Pita和LTH表现感病;子囊菌门(Ascomycota)是真菌的优势门(73.41%),变形菌门(Proteobacteria)是细菌的优势门(32.48%),7个土样在主要微生物种类组成上相似;抗、感单基因系根际土壤真菌在罗兹菌门(Rozellomycota)(分别为7.69%和14.66%,LTH为5.59%)及其下属的罗兹菌种(Rozellomycota_sp)(分别为6.97%和13.99%,LTH为5.59%)和担子菌门(Basidiomycota)的伞菌纲(Agaricomycetes)(分别为1.2%和0.7%,LTH为1.7%)及伞菌目(Agaricale)(分别为1.1%和0.5%,LTH为1.6%)上存在显著性差异(P<0.05);细菌在变形菌门(Proteobacteria)的 γ-变形菌纲未鉴定的目上存在显著性差异(P<0.05),相对平均丰度分别为10.02%和11.65%,受体LTH为8.55%,表明水稻抗性对根际土壤微生物丰度有影响.结果为探究稻瘟病的抗病机理和生物防治提供了线索.

关键词： 稻瘟病 单基因系 土壤真菌 土壤细菌 ITS1 16S rDNA

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适用于云南粳稻种植区的稻瘟病抗性基因分析

马继琼; 孙一丁; 杨奕; 李进斌; 许明辉; 《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：为筛选广适用于云南粳稻区的稻瘟病抗性基因,在云南宜良、建水、祥云、永平这4种生态条件下对22个抗稻瘟病单基因系抗病性进行了自然诱发鉴定;将在宜良筛选出来的来自中国8省区的89份抗叶瘟粳稻品种（系）进行了6个稻瘟病菌株的接种鉴定,并用Pib、Pikh、Pi9、Pi5基因功能性分子标记进行了基因分析。结果表明,单基因系Pib、Pikh、Piz、Pi9连续2年在4个试验点对叶瘟和穗颈瘟均表现抗病,Pi5前期感叶瘟,但均中抗穗颈瘟;Pia、Pi1、Pil9、Pi3、Pi12、Pii、Pikm、Pik、Piks、Pish、Pit、Pita和Pita2 13个单基因系在4个试验点均感叶瘟和穗颈瘟,Pi7、Pizt、Pikp、Piz5仅在永平和祥云点中的1～2个点表现抗病。接种鉴定表明89份资源中79份抗6个菌株（占88.76%）,8份抗5个菌株,2份抗4个菌株,从而确认这些材料对叶稻瘟病具有一定的抗性。89份资源基因分析表明携带Pib、Pikh、Pi9、Pi5的材料分别占62.92%、56.18%、21.35%、26.97%,但云南省内外存在差异,在云南省选育品种中分别为67.50%、57.50%、22.50%、37.50%,在云南省外品种中分别为62.16%、48.65%、27.03%、10.81%;78个材料携带Pib、Pikh、Pi9这3个基因中的1～3个,这可能是这些材料表现抗叶稻瘟的重要原因。本研究结果表明Pib、Pikh、Piz、Pi9、Pi5这5个基因在云南籼粳稻交错区-温暖粳稻亚区具有广泛的利用价值。

关键词： 水稻 稻瘟病 田间试验 抗病基因 分子标记

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水稻抗稻瘟病基因Bsr-d1的SNP区域在地方品种中的变异分析

刘畅媛; 孙一丁; 马继琼; 杨奕; 汤翠凤; 阿新祥; 郭怡卿; 许明辉; 《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：为揭示地方水稻品种中稻瘟病持久抗性基因Bsr-d1序列变异类型,本研究以收集到的缅甸、老挝和越南共79份地方水稻品种为供试材料,设计抗稻瘟病Bsr-d1基因特异引物对Bsr-d1基因启动子功能位点区段进行PCR扩增及测序分析。研究表明,79份地方水稻均持有抗稻瘟病Bsr-d1或bsr-d1等位基因,品种间存在18个变异位点和22个碱基的差异,根据差异所有品种可归为6种单倍型,其中H4和H6为优势单倍型,分别占测试品种的20.25%、58.23%;6种单倍型中仅H3单倍型携带抗性位点,有8个材料归为此类型,占10.13%。缅甸地方品种拥有H120（15.79%）、H220（2.63%）、H320（13.16%）、H420（18.42%）、H620（50%）等5种单倍型,优势单倍型为H6;老挝地方品种有H120（2.56%）、H320（7.69%）、H420（23.08%）、H520（2.56%）、H620（64.10%）205种单倍型,H6为优势单倍型,表明缅甸、老挝间在单倍型种类和抗性品种比例上均存在一定差异。本研究结果表明缅甸、老挝水稻资源携带持久抗性基因Bsr-d1的品种比例远高于中国品种,对中国选育稻瘟病持久抗性品种具有重要的利用价值,应加强对该地区种质的引进和分析评价。

关键词： 水稻 种质资源 稻瘟病 抗性基因 单倍型

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贵州禾落粒性基因qSH1调控区SNP分析

杨奕; 马继琼; 孙一丁; 许明辉; 《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：贵州禾是在贵州省黔东南地区种植的一类特殊的稻种,为探究其遗传特性,本研究对49份贵州禾和来源中国11个省市（自治区）和韩日的112份稻种的落粒性基因qSH1调节区序列进行测序分析。结果表明,161份供试品种在696个碱基序列上存在13个变异位点,归为6种DNA单倍型,在功能位点12 290上,仅H6为T,属不易落粒单倍型,其余单倍型均为G,属易落粒单倍型。贵州地方稻（包括贵州禾）出现了所有的6种单倍型,H5为优势单倍型,占85.48%,云南地方稻仅出现H2、H3、H5这3种单倍型,H3为优势单倍型,占62.49%,两省地方稻在基因型种类和优势单倍型上均存在差异。其余稻种（包括日韩品种）全归为H5、H6两种单倍型,中国北方省份80.95%品种归属单倍型H6,南方省份85.71%选育品种归于易落粒单倍型H5,南北方在优势单倍型上存在差异。49份贵州禾归为H1、H4、H5这3种单倍型,H1、H4仅在贵州禾中出现,H5为优势单倍型,占91.84%,贵州禾外的13份贵州地方水稻品种归为H2、H3、H5、H6这4种单倍型,H5是优势类型,占61.54%,贵州禾和贵州其他地方品种在基因型种类和优势单倍型频率上均存在差异。贵州禾q SH1基因型均属易落粒类型,不能解释其不易落粒的特性,推测qSH1另有调控机制或qSH1不是贵州禾落粒性的主要驯化位点。

关键词： 贵州禾 落粒性 qSH1 序列分析

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不同叶稻瘟抗性水稻品种对根际真菌的影响

马继琼; 孙一丁; 杨奕; 许明辉; 《江苏农业科学 》 2021 北大核心

摘要：为了解水稻稻瘟病抗性与土壤根际真菌之间的关系,利用ITS高通量测序技术对7个不同抗稻瘟病水稻品种土壤根际真菌ITS1序列进行分析。结果表明,共检测到根际真菌ITS1有效片段486 250个,以97%的相似度聚为1 178分类操作单位（operational taxonomic unit,简称OTU）;物种查询显示,归为12个门（含1个未分类的真菌群）,35个纲（含8个未分类的菌群）,82个目（含12个未分类的菌群）,146个科（含34个未分类的菌群）,248个属（含63个分类地位未定或未分类的菌群）和362个种（含63个未分类种）。7个土样真菌门类相似,子囊菌门（Ascomycota）是最大的优势菌门,相对丰度为67.04%。抗和感稻瘟病品种群土样在稻绿核菌属（Ustilaginoidea）和稻绿核菌（Ustilaginoidea sp.）上存在显著性差异（P<0.05）,其相对丰度平均数分别为5.09%、7.31%,即在稻瘟病病菌侵染条件下抗稻瘟病品种对稻曲病病原菌稻绿核菌具有抑制作用。结果可为探寻水稻抗稻瘟病机制提供土壤微生物的线索。

关键词： 稻瘟病 根际真菌 ITS1序列 测序

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