科研产出
豌豆中GPAT基因编码cDNA的克隆及分析(英文)
《云南大学学报(自然科学版) 》 1998 CSCD
摘要:参照国外报道的豌豆GPAT基因cDNA序列,设计并合成一对寡核苷酸引物,通过RTPCR技术,从云南地方栽种的豌豆品种中分离到了GPAT基因的编码cDNA片段,并将其纯化后直接克隆到pGEMT载体系统中,经NcoⅠ和NotⅠ双酶切鉴定,所得的重组质粒中含有1380bp左右的片段.采用PstⅠ,HindⅢ两种限制性内切酶进行酶切,酶切图谱分析表明所克隆的豌豆GPAT基因编码cDNA的酶切图谱与国外所报道的该基因cDNA的酶切图谱一致,暗示了该基因在进行上具有一定的保守性.
关键词: 甘油-3-磷酸转酰酶基因,聚合酶链式反应,基因克隆,豌豆
简并引物在PCR扩增甘油-3-磷酸转酰酶基因中的应用
《云南植物研究 》 1998 北大核心 CSCD
摘要:应用高简并引物,结合PCR扩增技术从南瓜Cucurbitamoschata总RNA的逆转录产物中得到了GPAT基因保守区。在PCR反应中,简并引物之间的浓度配比是影响扩增效率的关键。用脱氧次黄苷(dI)替代简并引物中的高简并位点,可大幅度降低简并程度,显著提高扩增产物的特异性及扩增效率。
关键词: 简并引物,聚合酶链式反应(PCR),甘油-3-磷酸转酰酶(GPAT)
印楝素对斜纹夜蛾幼虫取食行为的影响
《浙江农业大学学报 》 1998 北大核心
摘要:研究了经印楝素处理后斜纹夜蛾[Spodopteralitura(Fabricius)]5龄幼虫的取食行为.结果表明:斜纹夜蛾5龄幼虫24h内发生的取食活动和取食间间隔的次数减少,平均每次取食活动和取食间间隔持续的时间延长;在每次取食活动中,用于取食的时间明显减少,这主要是因为在每次取食活动中,取食内间隔的次数增加了,并且取食内间隔的时间也延长了.所有上述有关取食行为的指标,处理虫与对照虫之间均存在显著或极显著的差异.
关键词: 斜纹夜蛾;幼虫;印楝素;拒食剂;取食行为
高稳系数法分析玉米新品种高产稳产性
《玉米科学 》 1998
摘要:对玉米新品种高产稳产性评价,都是用数个参数来综合评判。在评判中往往出现高产性与稳产性互不相关的结论。本文采用高稳系数法(HSC)评判玉米新品种的高产稳产性,结果表明其在玉米育种中切实可行。
半套式PCR技术在植物基因克隆中的应用
《云南大学学报(自然科学版) 》 1998 CSCD
摘要:常规PCR方法在分离克隆已知序列的基因中发挥着重要的作用,但要求目的基因片段与引物间的同源性几乎是100%,一旦引物序列与目的基因间存在有差异,便往往会导致扩增的特异性不强,扩增效率不高,给克隆带来很大的困难.在常规PCR基础上,若所分离的基因在不同植物间存在保守序列,依据这一序列再合成一对引物,进行半套式PCR则能大大提高扩增的特异性及扩增效率.对于较长的基因片段而言还能同时完成亚克隆.本文依据南瓜GPAT(甘油-3-磷酸酰基转移酶)基因cDNA序列及比较拟南芥菜、豌豆间在该基因内的保守区段序列合成相应引物来分离克隆黑子南瓜及西瓜GPAT基因的cDNA片段为例来说明半套式PCR技术在植物基因克隆中的应用
关键词: 半套式PCR,基因克隆,应用