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马铃薯茎尖小滴玻璃化法超低温保存及其再生植株的遗传稳定性

园艺学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:马铃薯试管苗为试材,对其茎尖小滴玻璃化法超低温保存的影响因素进行了研究,并对再生植株进行了遗传稳定性检测。结果表明,马铃薯茎尖依次在含有0.3mol·L-1和0.5mol·L-1蔗糖的液体MS培养基中预培养各1d后,在0℃下PVS2处理30min,转到铝箔条上PVS2小滴上(约15μL),将粘有茎尖的铝箔条在液氮里蘸一下,然后直接装入盛满液氮的冷冻管中,投入液氮至少保持1h。室温下用含有1.2mol·L-1蔗糖的MS液体培养基解冻并洗涤30min后,接种到MS+0.5mg·L-1Zeatin+0.1mg·L-1NAA+1.0mg·L-1GA3恢复培养基上,存活率和再生率最高达79.91%和62.52%。通过SSR分子标记检测,再生植株的遗传稳定性没有发生改变。

关键词: 马铃薯 离体茎尖 小滴玻璃化法 超低温保存 遗传稳定性

超低温保存法去除马铃薯X病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒

分子植物育种 2010 CSCD

摘要:病毒病严重危害马铃薯生产,是造成马铃薯减产和品质下降的主要因素。PVX和PSTVd属于危害马铃薯最主要的病毒。本文尝试用超低温保存法和常规方法(茎尖分生组织培养、温热疗法以及温热疗法结合茎尖分生组织培养)来去除马铃薯试管苗中的PSTVd和PVX。结果显示马铃薯茎尖经过超低温保存后,存活率和成苗率分别为83.64%和72.04%,高于茎尖分生组织培养(46.67%和31.49%)、温热疗法(72.22%和44.44%)以及温热疗法结合茎尖分生组织培养(50.54%和30.38%)。4种方法都可以去除PVX,其中超低温保存法的脱毒率最高,为59.13%,温热疗法结合茎尖分生组织培养为56.02%,温热疗法和茎尖分生组织培养较低,为42.61%和35.83%。但是4种方法都未能有效地去除PSTVd类病毒,只能通过严格检疫来控制。

关键词: 马铃薯 PSTVd PVX 超低温保存法 茎尖分生组织培养

马铃薯杂交技术规程及影响因素分析

农业科技通讯 2009

摘要:马铃薯杂交育种成功的关键是根据育种目标配制杂交组合。不同品种的开花结实性差异很大,针对不同的杂交亲本,需要通过改善杂交圃的温、光、湿等环境条件、采用适合的杂交技术来配制需要的杂交组合。文章归纳了马铃薯的杂交技术规程,对影响杂交组合配制的关键因素进行分析,并介绍了提高马铃薯杂交结实率的一些技术措施。

关键词: 马铃薯 杂交技术 影响因素

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马铃薯质体表达载体构建及GFP基因在块茎中的瞬时表达

作物学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:利用高等植物质体基因组在进化中高度保守的特点,根据烟草质体基因组全序列设计合成引物,PCR扩增并克隆了马铃薯质体的trnI-trnA基因片段。将测序正确的trnI基因和trnA基因作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn-gfp-aadA-TpsbA表达盒的马铃薯质体定点转化载体pBMLSIA-GFP,酶切鉴定表明,所构建载体符合预期设计。采用该载体对马铃薯块茎进行基因枪法转化,结果表明,GFP基因可在质体特异性启动子Prrn及终止子TpsbA的调控下在马铃薯块茎中瞬时高量表达,经基因枪轰击后马铃薯块茎在紫外投射仪下产生很强的绿色荧光,在距离为6cm,压力1100psi轰击2枪的条件下产生的绿色荧光最强。马铃薯块茎可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析表明,GFP蛋白表达量约占总可溶性蛋白的15.4%~30.2%,均达到了较高的表达水平。该载体对后期马铃薯质体转化体系的建立和其他功能基因导入马铃薯质体进行性状改良具有重要应用价值。

关键词: 马铃薯 质体 载体构建 GFP基因 瞬时表达

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云南马铃薯原位贮藏及其区域生态特点

中国马铃薯 2008

摘要:云南特有的马铃薯原位贮藏可以利用自然条件、经济有效地将块茎从9月原地保存,最长延迟到来年3月收获。范围包括滇东北、滇西北和滇中,海拔2250~3100m的高寒山区,约占全省总播种面积的3.39%,总产量的5.01%。区域内9月至2月的20cm地温,最低海拔为9~20℃;最高海拔为3.1~13.1℃。平均降水量11~88mm。定点记录20cm贮藏层温湿度和观察块茎,9月至2月的最低温度2.03℃(2月)~最高温度17.14℃(9、10月),日内温差1.91~4.89℃,月平均相对湿度40.25%~62.75%,重量损失11%以下,基本无烂薯和虫害及鼠害。3月以后温度最高达到29.10℃,最大日温差15.40℃,湿度降低到25.8%,不利于块茎的贮藏。

关键词: 云南 马铃薯 原位贮藏 生态特点

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马铃薯种薯抹芽播种对产量的影响评价

西南农业学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:芽生长过长和细弱的种薯,需要抹芽播种,块茎表现出生理年龄老化,干瘪皱缩。抹芽种薯出苗晚,苗期的抗逆性差,植株生长势较弱,早衰。植株主茎细,匍匐茎多,形成块茎小而多,单株产量低、单薯重量低,商品率不高。最终产量降低15.56%~49.97%。单薯重量减少0.008~0.044 kg,单株重量减少0.01~0.22 kg,商品薯率减少12.49%~45.08%。

关键词: 马铃薯 种薯 抹芽播种

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农杆菌介导的Bt基因转化马铃薯的研究

云南大学学报(自然科学版) 2008 北大核心 CSCD

摘要:马铃薯块茎蛾的危害极为严重,通过植物基因工程将Bt基因的Cry1Ab类型导入马铃薯,以期获得抗虫性提高的马铃薯基因工程植株.以马铃薯品种‘会-2’为受体材料,对影响转化效率的因素进行了优化,结果表明:3号(1/2MSO+50μLAs+2 mL农杆菌悬浮液)浸染液有利于抗性芽的分化,乙酰丁香酮可以提高叶片的转化率,共培养3 d的分化率较高.共获得经过卡那霉素筛选的114个转化植株,对初筛株系进行PCR分子鉴定,结果有55%的植株扩增出目的条带,初步证明Cry1Ab基因已整合到马铃薯的基因组中.转化植株的抗虫性鉴定正在进行中.

关键词: 农杆菌 Cry1Ab基因 基因转化 马铃薯 转基因植株

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用两个微卫星标记分析云南马铃薯晚疫病菌的遗传多样性

中国农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:【目的】检测不同马铃薯产区晚疫病菌基因型的特征,揭示马铃薯晚疫病菌群体的进化潜能和演替。【方法】用已开发出来的微卫星标记(SSR)对云南省23个马铃薯产区的晚疫病菌群体的遗传结构进行研究。【结果】在两个SSR位点Pi4B和Pi4G上共检测到8个等位基因,占优势的等位基因是218和161,基因频率分别为84.02%、32.52%。在分析的235个云南晚疫病菌菌株中,检测到18个不同的SSR基因型,其中8个新的SSR基因型谱系H-03、H-04、H-05、H-06、H-07、I-01、J-01和K-01被首次检测到;SSR基因型D-03、D-05、H-01和H-05是云南马铃薯晚疫病菌群体的优势谱系,在云南的群体中所占的比例分别为20.85%、22.98%、15.32%和19.57%,分布于云南的大部分马铃薯产区。【结论】云南马铃薯晚疫病菌群体遗传多样性在地理分布上差异明显,滇中多季作种植区晚疫病菌群体显示了较高的遗传多样性,滇南冬播作一季种植区群体结构单一。有证据表明中国云南晚疫病菌群体与其它国家20世纪80年代后出现的晚疫病菌群体在遗传上存在关联。

关键词: 马铃薯 晚疫病菌 微卫星标记 遗传多样性

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云南省马铃薯、番茄晚疫病菌对甲霜灵敏感性及地理分布

西南农业学报 2007 CSCD

摘要:用含药平板法对2003年至2005年分离自云南省22个马铃薯和番茄产区的257个马铃薯和番茄晚疫病菌菌株的甲霜灵敏感性进行了系统的测定。结果表明,在11个马铃薯或番茄产区检测到甲霜灵抗性或中抗菌株的马铃薯和番茄晚疫病菌对甲霜灵的敏感性表现出明显的差异,马铃薯晚疫病菌主要由甲霜灵敏感群体组成,而番茄晚疫病菌主要由甲霜灵抗性和中抗群体组成。测定的167个马铃薯晚疫病菌中,甲霜灵抗性、中抗、敏感菌株分别为20.4%、7.2%和72.4%;测定的90个番茄晚疫病菌中,甲霜灵抗性、中抗、敏感菌株分别为56.7%、28.9%和14.4%。马铃薯和番茄晚疫病菌对甲霜灵抗性和中抗菌株在滇中多季作种植区内发生的比例较高。甲霜灵的药效已在云南省的少数马铃薯和大部分番茄产区下降甚至失效,因此,避免长期使用单一的杀菌剂对晚疫病进行防治是非常必要的。

关键词: 马铃薯 番茄 晚疫病菌 甲霜灵 抗药性

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马铃薯脱毒快繁抗菌污染的研究

西南农业学报 2007 CSCD

摘要:分别加入10、20和50 mg/L的氨苄青霉素、硫酸链霉素、克林霉素及利用3种抗生素(20 mg/L)分别和病毒唑(10 mg/L)的配合使用,研究抗生素及抗生素浓度在马铃薯茎尖剥离及快繁过程中的综合影响。实验结果表明在茎尖剥离阶段,50 mg/L的链霉素对细菌的抗性最好;抗生素的不同浓度对霉菌抗性的效果不同,抗生素种类和浓度的互作对霉菌具有抗性效应,以使用10mg/L的链霉素对霉菌的抗性最好,链霉素+病毒唑组合在茎尖剥离时期对霉菌和细菌的抗性最好;在快繁阶段,以使用20 mg/L克林霉素对霉菌和细菌的抗性最好,但抗生素及抗生素+病毒唑的配比措施对组培苗的生根数、黄化率、生根率均有负效应,所以在马铃薯组培快繁阶段的污染控制主要靠控制环境和操作规程来达到。

关键词: 马铃薯 茎尖培养 试管苗快速繁殖 培养基 抗污染

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