科研产出
胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒
《电子显微学报 》 2015 CSCD
摘要：本实验利用胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus,TZSV),分别以TZSV的N蛋白多克隆抗体及TZSV的Gn蛋白多克隆抗体为一抗,然后以胶体金标记羊抗兔Ig G-gold(10 nm)为二抗对病毒进行胶体金标记,电镜观察用TZSV Gn蛋白抗体标记的胶体金颗粒能很好地结合到病毒粒体上。结果表明该方法可以实现对TZSV更为准确可靠地检测。
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番茄环纹斑点病毒与马铃薯Y病毒复合侵染烟草的细胞病理特征
《植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：在自然情况下,番茄环纹斑点病毒(TZSV)和马铃薯Y病毒(PVY)通常复合侵染同一植株。该文首次报道了TZSV和PVY复合侵染烟草(Nicotiana sp.)植株的细胞病理特征,并与单独侵染进行了比较分析。复合侵染的烟草植株细胞中,TZSV病毒颗粒明显增多,并聚集于囊膜内形成包涵体,与PVY的风轮状及片层状内含体和病毒颗粒聚集体交叉分布于细胞质(内含线粒体明显增多)中,线粒体、叶绿体和细胞核结构较完整;两种病毒的颗粒、包涵体和内含体数量均较单一侵染增多,且对寄主亚细胞结构的破坏较单一侵染为轻,TZSV和PVY及其与寄主的互作可能存在协生作用。
关键词： 番茄环纹斑点病毒 马铃薯Y病毒 烟草 复合侵染 细胞病理特征
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侵染云南烟草的番茄环纹斑点病毒N基因的分子变异分析
《植物病理学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：应用电镜观察和ELISA检测从云南11个县(市)烟草种植区采集的烟草上检测到番茄环纹斑点病毒(Tomato zonatespot virus,TZSV)。根据TZSV N基因设计引物扩增得到了31个TZSV分离物N基因全序列。测序分析表明,31个TZSVN基因核苷酸序列与GenBank中报道的序列相似性在94.9%～98%之间,其推导的氨基酸序列同源性为98.2%～99.3%。构建系统进化树发现云南不同地区的TZSV分离物存在一定差异。氨基酸序列比较发现,文山分离物和西畴分离物具有2个该地区独有的氨基酸位点。
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番茄环纹斑点病毒核壳体蛋白抗血清制备及其血清学特性分析
《植物病理学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)是番茄斑萎病毒属的一个新种,对云南番茄、辣椒生产造成严重危害。用RT-PCR从感病番茄中扩增得到长度为837 bp TZSV的核壳体蛋白基因(N基因),将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),获得重组原核表达载体pET-TZSV-N,在大肠杆菌BL21中表达,SDS-PAGE分析表明,该载体高效表达33kDa的融合蛋白;以纯化的融合蛋白作为抗原免疫家兔制备TZSV核壳体蛋白(N蛋白)的多克隆抗体,间接酶联免疫测定(ID-ELISA)表明效价为1/6 000;Western blot分析表明,该抗血清能与西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)血清组的辣椒褪绿病毒(CaCV)反应,而与番茄斑萎病毒(TSWV)、凤仙花坏死斑病毒(INSV)无血清交叉反应,说明获得的抗血清能用于WS-MoV血清组成员的检测,TZSV属于WSMoV血清组成员。
关键词： 番茄环纹斑点病毒 核壳体蛋白 原核表达 血清学相关性
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3种番茄斑萎病毒属病毒侵染寄主植物的细胞病理特征
《西南农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：应用超薄切片电镜观察,对3种番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒侵染寄主细胞病理特征进行了比较分析。番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot viru,s TZSV)侵染的番茄,叶部细胞中病毒粒体呈块状聚集于内质网池中,果实细胞中呈块状、管状或单个粒体散布于细胞质中,细胞核较完整,叶绿体空泡化;凤仙花坏死斑病毒(Impatiens necrotic spot virus,INSV)侵染的蝴蝶兰叶部细胞和亚细胞结构消失,病毒粒体分布较少,聚集于细胞质中的内质网池内;花生黄斑病毒(Groundnut yellow spot viru,s GYSV)侵染的辣椒果实的亚细胞结构较完整,病毒粒体呈块状聚集于细胞质的囊腔内。研究结果表明,不同种类的Tospovirus病毒侵染寄主植物后,其病毒粒体在寄主细胞内的分布、聚集方式及对亚细胞结构的影响具有明显差异,可作为诊断的依据。
关键词： 番茄环纹斑点病毒 凤仙花坏死斑病毒 花生黄斑病毒 细胞病理
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