科研产出
甘蔗转基因的研究进展
《中国农学通报 》 2016
摘要：甘蔗作为重要的糖料作物和遗传转化高安全级别的经济作物,其遗传转化的研究一直倍受重视。目前应用于甘蔗中的转基因技术主要是基因枪介导法和农杆菌介导法。近年来甘蔗的转基因研究主要以新型抗病虫、抗寒、抗旱和高糖以及作为生物反应器生产高附加值产品为主,同时在转基因生物的检测研究中也取得了较大的进展。但是甘蔗的转基因还是受到一些因素的限制,转化效率低、基因表达效率不高、转基因安全性研究少以及可能存在的法律和社会问题等。建立多个甘蔗主栽品种高效、快速、稳定的遗传转化体系,研究安全型系统,开展大片段基因、多基因转化,实现基因的时空控制表达等将是甘蔗转基因技术的新的发展趋势。
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固相萃取-气相色谱-质谱联用法测定葱姜蒜中12种农药残留量
《西南农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：建立了固相萃取-气相色谱-质谱联用法同时测定葱姜蒜中12种农药残留量的方法。试样经乙腈提取后,采用氟罗里硅土固相萃取小柱净化,然后用气相色谱-质谱联用法对12种农药进行定量分析。结果表明,采用氟罗里硅土固相萃取小柱净化,能有效去除葱姜蒜样品中的色素、油脂等杂质,净化后得到的样液清亮、透明。12种农药在0.005~0.22 mg/kg添加水平下的回收率为81.0%~120%,相对标准偏差为2.33%~16.2%,12种农药检出限为0.003~0.05 mg/kg。
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酶联免疫法测定辣椒中辣椒素含量
《中国农学通报 》 2015 CSCD
摘要：旨在建立一种简便快速低成本的辣椒素测定方法。辣椒样品中辣椒素经69.15%乙醇,振摇10 min,离心5 min,取上清液100μL,置于2.0 m L样品瓶中,加0.9 m L去离子水,旋涡混匀后用于酶标仪分析。结果表明:标准曲线满足线性方程Y=-42.9X+30.3,相关系数R2=0.9999;在100 mg/100 g添加水平下,平均回收率测为92.6%,重复性相对标准偏差小于3.5%;方法检出限为0.25 mg/100 g。300余份新鲜辣椒样品中辣椒素含量测定结果在1.50~323.8 mg/100 g之间。采用酶联免疫法测定辣椒中的辣椒素含量,有操作简单、测定速度快等优点,尤其适合批量样品的测定。
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番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体p ET-30 a中,获得原核表达载体p ET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57k Da融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192。用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功能奠定了基础。
关键词： 番茄环纹斑点病毒 非结构蛋白 原核表达 抗血清 检测
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富源县魔芋主要土传病害发生及危害监测
《云南农业科技 》 2015
摘要：采用系统监测法,对富源县10个魔芋种植乡(镇)的魔芋主要土传病害发生和危害程度进行调查,初步摸清了全县的病害发生和危害情况,为指导农户及时防治魔芋病害提供科学依据。
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基于VBL增白剂细胞染色的水稻原生质体细胞壁变化检测
《贵州农业科学 》 2014 北大核心
摘要：为快速、准确地观察水稻原生质体制备及培养过程中水稻细胞壁的去除和再生情况,利用荧光增白剂VBL细胞壁染色液对细胞进行染色,制片后置于激发波长为345nm、发射波长为430nm的荧光显微镜下观察。结果发现,在原生质体制备过程中,细胞周围发出的蓝色荧光初期表现分布均匀且荧光强烈,之后逐渐变为分布不均匀且荧光暗淡,最后蓝色荧光消失,表明纤维素逐渐被酶解去除;在原生质体培养过程中荧光情况与制备过程的刚好相反。结论:利用荧光增白剂VBL细胞壁染色液染色通过荧光强弱变化对比,可以快速、准确地检测水稻原生质体制备及培养过程中细胞壁的变化。
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固相萃取-气相色谱-质谱联用法测定烟草中异丙甲草胺、仲丁灵、氟节胺、敌草胺的残留量
《西南农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：建立了固相萃取-气相色谱-质谱联用法同时测定烟草中敌草胺、乙丙甲草胺、仲丁灵、氟节胺4种农药残留量的方法。试样经乙腈提取后,采用石墨炭黑-氨基固相萃取小柱净化,然后用GC/MS-SIM法对4种农药进行定量分析。结果表明,采用石墨炭黑-氨基固相萃取小柱净化,能有效去除烟草样品中的色素、油脂等杂质,净化后得到的样液清亮、透明。4种农药在0.025~0.5mg/kg添加水平下的回收率为81.8%~108%,相对标准偏差为1.38%~8.95%,乙丙甲草胺、仲丁灵、氟节胺的检出限为0.005mg/kg,敌草胺检出限为0.01 mg/kg。
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粗茎秦艽种子检验方法
《西南农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：参照农作物种子检验规程(GB/T 3543)的方法,对云南维西产粗茎秦艽种子的真实性、净度、水分、重量和发芽率等品质指标进行了检验。结果表明,粗茎秦艽送检种子批次的最大重量应为5000 g,送检样品最小重量为25 g,净度分析试样最小重量为5g;种子真实性鉴定采用感官加显微观测法,重量测定采用千粒法,水分测定采用高温烘干法(130~133℃,1 h)。发芽试验采用纸床法,可采用20℃温汤浸种24 h或赤霉素(GA3)50×10-6溶液浸种8h进行种子处理,其发芽记数时间分别为10~28 d和10~32 d。本研究初步建立了粗茎秦艽种子检验方法,为制定粗茎秦艽种子检验规程提供了依据。
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马铃薯Y病毒云南昭通烟草分离物的检测及年度间差异比较
《植物保护 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：利用DAS-ELISA检测试剂盒检测昭通烟草脉斑病样品,结果表明存在马铃薯Y病毒O株系和马铃薯Y病毒N株系两个不同株系病毒。利用Sprimer和M4引物扩增、克隆、测序,得到长度为1 771bp目的片段,该片段包含病毒的外壳蛋白基因序列、3′UTR序列以及部分Nib基因序列;序列分析表明与湖南HN-2分离物(GenBankNo.GQ200836)和美国NE-11分离物(GenBank No.DQ157180)核苷酸序列相似性均为98%,系统进化分析表明其具有较近的亲缘关系。
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