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控制花色的细胞色素P450基因的cDNA克隆及限制性内切酶图谱分析

文献类型： 中文期刊

作者： 鄢波 1 ; 周晓罡 1 ; 陈莉 1 ; 黄兴奇 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院生物技术研究所

关键词： 花色控制基因，细胞色素P450，矮牵牛，基因克隆

期刊名称： 遗传

ISSN： 0253-9772

年卷期： 1998 年 S1 期

页码：

收录情况： 北大核心

摘要： 提取云南的一种矮牵牛的总ＲＮＡ，用Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）作为引物反转录合成ｃＤＮＡ第一链。以此为模板，用参照国外报道的矮牵牛细胞色素Ｐ４５０基因ｃＤＮＡ序列而自行设计并合成的一对寡核苷酸引物进行ＰＣＲ扩增，并将其产物纯化后直接克隆到ｐＧＥＭＴ载体系统中，转化大肠杆菌ＤＨ５α，在Ｘｇａｌ平板上筛选白色菌落，经ＳｐｈⅠ和ＮｏｔⅠ双酶切，鉴定所得的重组质粒中含有１５８０ｂｐ左右的ＰＣＲ扩增片段。采用ＰｖｕⅡ、ＨｐａⅠ、ＸｈｏⅠ、ＥｃｏＲＶ、ＮｄｅⅠ、ＮｓｉⅠ等６种限制性内切酶进行酶切图谱分析鉴定，表明所克隆的矮牵牛细胞色素Ｐ４５０基因ｃＤＮＡ序列与国外迄今所报道的一例该基因的ｃＤＮＡ酶切图谱一致，提示了该基因在进化上的保守性。目前我们正在进行含该基因的植物表达载体的构建，准备花卉的转基因研究，探索产生某些蓝色花卉的可能性。

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