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家蚕微孢子虫SWP25基因BmN细胞表达质粒的构建及表达

文献类型： 中文期刊

作者： 肖圣燕 1 ; 李镇刚 1 ; 冉瑞法 1 ; 黄平 1 ; 朱峰 1 ; 沈中元 2 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

2.江苏科技大学

关键词： 家蚕微孢子虫;孢壁蛋白SWP25基因;Bac-to-Bac表达系统;重组质粒;转染;融合蛋白表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2016 年 32 卷 05 期

页码： 1023-1028

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在构建含家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25的家蚕卵巢细胞(BmN)表达质粒,检测该基因在宿主细胞中的表达,为在细胞水平筛选与家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25相互作用的宿主蛋白奠定基础。利用家蚕核型多角体病毒Bac-to-Bac表达系统,将家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25和报告基因EGFP克隆到杆状病毒转移载体pFast Bac1中,转化BmDH10Bac感受态细胞并筛选阳性重组质粒用于转染BmN细胞。经PCR技术鉴定,成功获得重组杆状病毒质粒v BmEGFP-SWP25。在转染成功的细胞中可观测到绿色荧光信号。使用Western blot方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞中检测到大小约55 000的重组蛋白条带,与理论值一致,表明家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25在BmN中成功表达。

  • 相关文献

[1]家蚕微孢子虫感染对家蚕BmN细胞凋亡以及凋亡蛋白抑制因子IAPs表达的影响. 朱峰,肖圣燕,张永红,邵榆岚,唐芬芬,陈世良,白兴荣. 2017

[2]母蛾经高温干燥处理不同时间对体内家蚕微孢子虫的灭活效果. 陈世良,杨荣贵,高建华,高翔,张金祥,朱峰. 2015

[3]家蚕微孢子虫海藻糖合成酶基因Nbtps1的克隆与原核表达. 朱峰,李孝良,唐旭东,徐莉,白兴荣,沈中元. 2017

[4]家蚕微孢子虫感染对家蚕海龟蛋白(Bmtutl)基因表达水平的影响. 朱峰,高建华,张永红,肖圣燕,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019

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