科研产出
家蚕淀粉酶基因(Bmamy2)的分子克隆及表达特征和序列分析
《蚕业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：淀粉酶在生物体内的碳水化合物代谢中起重要作用。根据预测的基因序列设计引物,克隆了一个家蚕淀粉酶基因(Bmamy2),获得完整的编码区序列(全长1 752 bp,编码583个aa)。用推导的氨基酸序列与其它物种的淀粉酶基因作相似性比较和系统发育分析,发现所克隆的Bmamy2基因是一个起源很早的拷贝,在细菌、果蝇、非洲蟾蜍、人和鸡等多种生物中存在与之同源的基因。该基因编码蛋白的功能结构域预测有2个起催化作用的关键氨基酸发生突变,推测该基因可能失去了催化水解碳水化合物的功能。RT-PCR和基因芯片检测结果表明,该基因在家蚕5龄第3天幼虫的中肠和脂肪体中表达,且在中肠中的表达丰度较高。
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柑橘衰退病毒柠檬分离物外壳蛋白基因原核表达及多抗血清制备
《云南大学学报(自然科学版) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：在云南发现的柑橘衰退病毒柠檬分离物对云南省德宏州的柠檬产业造成较大危害.通过用NdeⅠ和XhoⅠ对柑橘衰退病毒柠檬分离物外壳蛋白基因进行双酶切,定向插入到表达载体pET-28a中,并转化大肠杆菌BL21,经IPTG在28℃下诱导6 h后,SDS-PAGE电泳显示,在25 kDa处有特异表达谱带,回收特异蛋白带作为抗原免疫家兔,制备出特异抗血清.间接ELISA测得效价为1∶3000,并且与CTV具有良好的特异性反应.
关键词： 柑橘衰退病毒柠檬分离物 外壳蛋白 原核表达 抗血清
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水稻白叶枯病菌luxR同源基因的克隆和表达
《复旦学报(自然科学版) 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：luxR基因是革兰氏阴性菌感应反应(QuorumSensing,QS)LuxR/LuxI环路中起重要作用的基因.从水稻白叶枯病菌中分离到一个luxR同源基因,命名为xooR.xooR全长765bp,编码一个由254个氨基酸残基组成的转录因子,分子质量和等电点分别为28.3ku和8.72.XooR蛋白的N-端15AA-171AA是一个Autoind-bind结构域,C-端191AA-245AA是一个HTH(helix-turn-helix)结合DNA结构域.利用原核表达载体pET-24a(+)和gfp基因构建融合蛋白表达系统,Westernblot分析表明XooR-GFP融合蛋白大小为54ku,xooR基因成功地在E.coliBL21中实现了表达.
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高分子量麦谷蛋白亚基表达量与小麦加工品质性状的关系研究
《云南农业大学学报 》 2004 CSCD
摘要：高分子量麦谷蛋白亚基表达量是影响小麦品质性状的重要原因之一。用251份我国秋播麦区主栽品种和高代品系研究了高分子量麦谷蛋白亚基表达量与全粉蛋白质含量、SDS沉降值、和面时间、耐揉性及弱化值的关系。结果表明,20亚基的表达量最高,而8亚基的表达量最低。高分子量麦谷蛋白亚基表达量与全粉蛋白质含量和SDS沉降值的相关系数较高,与和面时间、耐揉性及弱化值的相关系数较低。就单个亚基的表达量而言,5亚基的表达量与SDS沉降值、和面时间、耐揉性和弱化值的相关性较高,皆达1%的显著水平,相关系数分别为0.38,0.46,0.37和0.37,10亚基的表达量与全粉蛋白质含量、SDS沉降值、和面时间、耐揉性和弱化值的相关系数较小,分别为0.22,0.08,0.03,0.04和-0.03.
关键词： 普通小麦 高分子量麦谷蛋白亚基 表达量 加工品质
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胶原Ⅳα_1链NC1结构域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
《云南大学学报(自然科学版) 》 2002 CSCD
摘要：胶原中多个成分如ⅩⅤ ,ⅩⅤⅢ的NC结构域能抑制血管内皮细胞增殖和迁移 ,具有抑制肿瘤生长和转移的活性 .从胎盘组织中提取总RNA ,根据文献报道的胶原Ⅳα1链cDNA序列 ,设计一对特异性引物 ,应用RT -PCR方法扩增出胶原Ⅳα1链NC1结构域基因 .DNA序列测定发现 ,扩增得到的基因与文献报道序列存在单个核苷酸变异 (A132C) ,编码氨基酸 (Gly)不变 .将扩增得到的胶原Ⅳα1链NC1结构域基因克隆到原核表达载体 pPROEXHTb上 ,并在大肠杆菌BL2 1中进行体外表达
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血管生成抑制因子canstatin基因的克隆及表达
《云南大学学报(自然科学版) 》 2001 CSCD
摘要：Canstatin是最近发现的能抑制新生血管生成和肿瘤生长的又一血管生成抑制因子 .从胎盘组织中提取总RNA ,根据已知canstatin基因序列 ,设计特异引物 ,应用RT -PCR方法扩增出该基因片段 .DNA序列测定表明 ,与文献报道的该基因比较 ,核苷酸序列完全一致 .将扩增得到的该基因克隆于原核表达载体 pPROEX HTb中 ,在大肠杆菌E .coliBL2 1中经IPTG诱导获得了表达 ,表达量约占菌体总蛋白量的 2 0 %以上 .
关键词： canstatin基因 新生血管生成抑制 RT-PCR 表达
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人血管内皮抑素基因的克隆及其在原核中的表达
《生物技术 》 2000
摘要：以人胎肝组织为材料 ,提取总RNA ,经反转录和PCR扩增 ,得到血管内皮抑素基因 ,序列分析表明 ,与国外文献报道一致。将其克隆到大肠杆菌表达系统pGEX -KG ,分别在DH5α、BL - 2 1菌中以GST -Endostatin融合蛋白的形式高效表达
关键词： 血管内皮抑素(Endostatin)基因 pGEX-KG 克隆 表达
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