科研产出
月季和香水月季不同变种的染色体荧光原位杂交研究
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：以45S rDNA为探针对月季、香水月季不同变种进行了染色体荧光原位杂交,结果表明:月季、香水月季中,不同变种45S rDNA杂交位点数与染色体倍性变化基本一致,四倍体"大白花"有4个杂交位点,三倍体"杏花村"、粉红香水月季"维西永春"有3个杂交位点,二倍体紫月季、香水月季、大花香水月季和粉红香水月季‘昆明富民’均有2个杂交位点;月季和香水月季不同变种之间在45S rDNA杂交信号的强弱上存在差异,说明不同变种之间在染色体结构及45S rDNA拷贝数上存在多样性。
关键词： 蔷薇属 FISH 45S rDNA 月季 香水月季
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月季(Rosa chinensis)丁香酚合成酶基因RcEGS1的克隆及其表达分析
《园艺学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank发表的丁香酚合成酶(EGS)基因的蛋白保守序列设计引物,利用RT-PCR结合RACE-PCR技术,从古老月季(Rosa chinensis)品种‘月月粉’盛开期的花瓣中获得了1个新的丁香酚合成酶基因RcEGS1,GenBank登录号为JQ522949。该基因全长为1171bp,开放阅读框(ORF)951bp,编码317个氨基酸;蛋白质理论分子量为35.64kD,等电点为7.36。氨基酸同源性分析表明,RcEGS1与矮牵牛PhIGS1的氨基酸同源性达到70%,与罗勒ObEGS1的同源性为59%,与月季RhEGS1的同源性仅为48.2%。运用实时荧光定量PCR法分析RcEGS1在不同组织部位和不同开放时期花瓣中的表达,发现其在叶片和茎段中没有表达,在花瓣和萼片中有表达,在盛开期的花瓣中表达量最高。
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利用隶属函数值法评价月季耐寒性
《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：通过测定14个不同月季种质的相对电导率、丙二醛(MDA)、可溶性蛋白质、可溶性糖、叶绿素a、叶绿素b、游离脯氨酸含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性等生理指标,对14个不同月季种质材料的耐寒隶属函数值进行计算,对不同月季种质的耐寒性进行综合评价。
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月季丁香酚合成酶基因RhEGS1的克隆及表达分析
《中国农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆月季丁香酚合成酶基因RhEGS1的全长cDNA序列,分析其序列及表达特征,并对该基因编码的蛋白进行原核表达分析,为深入探讨丁香酚合成酶的生化特性奠定基础。【方法】根据已发表的其它植物EGS基因序列的保守结构域设计简并引物,结合RACE技术,获得RhEGS1的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用半定量RT-PCR对不同组织及不同花发育时期RhEGS1进行表达分析。采用Gateway克隆技术,构建原核表达载体,并进行原核蛋白表达。【结果】月季RhEGS1的cDNA全长为1 207 bp,包含一个927 bp的ORF,编码309个氨基酸。同源序列比对发现RhEGS1与仙女扇的CbEGS2有83.87%的同源性,与矮牵牛PhEGS1具有81.55%同源性。表达谱分析表明,RhEGS1主要在雄蕊中表达,且在花盛开期表达最强,而在花蕾期及凋谢期表达较弱。原核表达分析发现,在37℃、0.5 mmol.L-1IPTG诱导4 h后,携带RhEGS1 ORF的原核表达载体在大肠杆菌中生成了大量的分子量约为35 kD的蛋白质,其分子量大小与预测的理论值相一致。【结论】从月季雄蕊中克隆到丁香酚合成酶基因RhEGS1,具有EGS基因的结构特征和完整的编码框,且在盛开期雄蕊中表达量最高。
关键词： 月季 丁香酚合成酶基因 RT-PCR Gateway克隆 原核表达
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月季柱头形态发育进程与可授性
《西北农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为研究月季柱头的形态发育进程与可授性的相互关系,提高授粉效率。以切花月季为材料,显镜观察柱头在不同发育阶段的形态变化,田间定期授粉后荧光显微观察柱头花粉萌发情况,并采用联苯胺-过氧化氢法检验柱头可授性。结果表明,月季柱头发育阶段可分为4种形态时期,分别为柱头中间凹陷期、丫状期、柱头2裂片平展期、柱头乳突组织衰老期;最佳授粉时期为柱头2裂片平展180°左右时,持续时间24～60h;定期授粉观察以及联苯胺-过氧化氢检验发现,柱头不同形态时期的可授性结果一致。说明月季柱头形态发育与可授性存在直接联系,可通过观察柱头形态来确定最佳授粉时期。
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野蔷薇(Rosa multiflora)抗白粉病基因RmMlo的克隆与表达分析
《园艺学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以野蔷薇(Rosa multiflora)为试材,采用RT-PCR和RACE方法从叶片中获得了一个Mlo同源基因的cDNA全长,命名为RmMlo,GenBank登录号为JF310747。序列分析结果表明,RmMlo基因cDNA全长为1993bp,包含49bp的5′非编码区、243bp的3′非编码区和一个长度为1700bp编码567个氨基酸的开放阅读框。氨基酸序列分析显示其蛋白质的C末端具有两个保守的MLO模体。序列比对和系统进化分析表明,RmMlo与拟南芥等双子叶植物的Mlo亲缘关系较近,相似性达90%以上。半定量RT-PCR分析表明,RmMlo在感病叶片中的表达量最高,在根中不表达,其表达模式与拟南芥的AtMlo有一定差别。
关键词： 野蔷薇 月季 白粉病 Mlo基因 克隆 组织特异性表达
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6个月季品种的自交亲和性
《湖南农业大学学报(自然科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以云粉、云玫、蜜糖、蜜月、云艳、粉妆等6个月季品种为材料,采用离体培养与活体萌发法测定花粉生活力,统计分析田间自花授粉坐果率、平均种子数,并对授粉后花粉原位萌发及花粉管的生长过程进行荧光显微观察。结果表明,在活体和离体培养条件下,每个月季品种的花粉萌发率基本一致;云粉的离体和活体萌发率均最高,分别为(33.34±1.70)%和(31.56±1.63)%;蜜糖的坐果率最高,为60.00%,云粉次之,为39.24%,云艳最低,未结实。6个月季品种的平均种子数均较少,最多的云粉仅有11粒。自交亲和的品种自花授粉3 h后花粉开始萌发,24 h后到达花柱中部,48 h后有部分花粉管进入子房;自交不亲和的品种在授粉24 h后花粉管停止伸长,花粉管末端膨大、弯曲、变形。由自交坐果率与荧光显微观察结果得出的结论一致,云粉、云玫、蜜糖、蜜月为自交亲和品种,云艳、粉妆为自交不亲和品种。
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月季‘云粉’、‘云玫’的花粉活力和柱头可授性研究
《江西农业大学学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：采用红四唑(TTC)染色法测定切花月季新品种云粉、云玫的花粉活力和寿命,联苯胺—过氧化氢测定柱头的可授性,显微观察其柱头的形态、颜色变化,结合田间人工授粉试验研究其育性。结果表明:(1)23℃干燥条件下,散粉4 d内花粉活力保持在50%以上,保存10 d时,花粉活力降至6%以下。(2)云粉柱头活性持续时间为3 d以上,云玫不超过2 d,强可授性持续时间云粉远远高于云玫。(3)田间试验,云粉作母本结实率均高于70%,作父本时结实率差异极显著;云玫作亲本时,结实率不超过16%,甚至不结实。可为我国自主知识产权月季品种应用于杂交育种提供科学依据。
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