科研产出
流式细胞仪对甘蓝花粉倍性的测定
《湖北农业科学 》 2024 北大核心
摘要：利用流式细胞仪测定甘蓝（Brassica oleracea var. capitata）花粉的倍性，以甘蓝GL21028的花粉为材料，以叶片为对照，比较花粉2种处理方式、3种不同细胞裂解液、2种核酸染料的效果差异。通过B缓冲液处理后获取的花粉细胞可以直接染色，为最简便处理方式；采用“Aru”buffer和Y 2种裂解液，染色剂DAPI，处理甘蓝叶片和花粉，通过流式细胞仪检测，样本细胞DNA成峰集中，细胞碎片很少；配制的Y裂解液能够适用甘蓝材料流式细胞仪的观察。甘蓝花粉通过B缓冲液处理后，可以直接作为流式细胞仪倍性鉴定的材料，不再需要其他处理，配制的Y裂解液可以得到较好的试验结果。
关键词： 甘蓝（Brassica oleracea var. capitata） 流式细胞仪 花粉 测定 倍性 裂解液
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三株无量山森林土壤芽孢杆菌鉴定及其生物活性挖掘
《生物技术通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]挖掘无量山国家自然保护区潜在的高活性微生物菌株,旨在为农业绿色投入品研发提供高效的菌种资源.[方法]以番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum)为靶标筛选高拮抗活性菌株,观察对菌丝生长的影响,测定对孢子萌发的抑制作用;检测脂肽类化合物合成基因以及菌株体外产酶、解磷、解钾、固氮及产铁载体能力;结合形态学、生理生化特征和 16S rRNA、gyrA、rpoB基因进行菌株鉴定,室内盆栽试验验证防病和促生效果.[结果]分离筛选获得 153 株可培养细菌,其中,菌株SH-53、N4471 和N9456 抑菌效果分别为 92.35%、87.29%和 88.47%,能抑制病原菌菌丝生长和分生孢子萌发,且对多种病原菌表现出良好拮抗活性.3 株功能菌均具有溶锌、产淀粉酶和蛋白酶的能力,菌株SH-53 和N4471 还具有解磷、固氮、分泌纤维素酶以及产铁载体能力.3 个功能菌基因组中均含有srfA、fenA、ituA、ituC、ituD、bymC等脂肽类化合物合成基因.经鉴定菌株SH-53 为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),N4471 为卡式芽孢杆菌(B.cabrialesii),N9456 为暹罗芽孢杆菌(B.siamensis).盆栽试验结果表明,3 株功能菌防效分别为 84.66%、54.96%和 59.74%,对番茄幼苗的株高、茎粗、根长等农艺性状均具有较好促进作用.[结论]3 个菌株具有高效、广谱的抑菌活性,具有多样化的生物活性,作为高效的微生物资源具有广阔的应用前景.
关键词： 解淀粉芽孢杆菌 卡式芽孢杆菌 暹罗芽孢杆菌 鉴定 生物活性 番茄枯萎病 促生
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美国引进甘蔗热带种的ARMS PCR真实性鉴定
《中国糖料 》 2023
摘要：甘蔗遗传基础狭窄已经极大地阻碍了其育种进程,挖掘优异种质资源、创新亲本材料将成为未来甘蔗育种的重要方向之一.利用四引物扩增受阻突变PCR体系(ARMS PCR)对国家甘蔗种质资源圃保存的美国引进的 24 份疑似热带种材料进行真实性鉴定.PCR鉴定结果表明,供试材料中有'Green German'、'Black Fiji'、'Chittan'、'IN 84-072'和'NG 21-002'这 5份材料扩增带型与热带种'拔地拉'(Badila)一致,仅出现 428 bp的共有条带和 278 bp的热带种特有条带,属于热带种带型;而其它 19 份材料同时具有 278 bp的热带种特有条带和 203 bp的割手密特有条带,属于热带种与割手密的杂交种带型.经过上述分子鉴定得出结论,24 份美国引进的甘蔗种质中有'Green German'、'Black Fiji'、'Chittan'、'IN 84-072'和'NG 21-002'这 5 份材料为热带种材料,建议后续加强其农艺性状和抗性调查,并作为甘蔗热带种新血缘亲本进行杂交利用.
关键词： 甘蔗热带种 ARMS PCR 真实性 鉴定 甘蔗育种
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基于生长年限对白及类药材militarine成分的积累影响研究
《中华中医药学刊 》 2023 北大核心
摘要：目的 探讨不同生长年限的白及、小白及和黄花白及药材中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine,化学式为C_(34)H_(46)O_(17))成分的积累规律，为白及质量控制和近缘种资源的开发提供依据。方法 采用HPLC法，以XTerra Waters柱(5μm, 4.6 mm×250 mm)为色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液(22∶78)进行梯度洗脱，流速为1.0 mL/min,检测波长270 nm,测定各样品militarine的含量。结果 经过对HPLC图谱分析比较，不同生长年限的白及与其2种近缘种的militaeine成分含量差别较大，以4年生最高，3年生的次之，2年生则最低，相同生长年限的种间含量稍有差异，白及稍高，小白及与黄花白及稍低。结论 以3年及以上生长年限的白及作为药材原料具有一定的科学性。小白及、黄花白及与生长年限相同的白及的militarine含量相当，二者作为习用品具有一定的合理性，可为开展深入的资源评价提供参考依据。
关键词： 白及 近缘种 生长年限 HPLC Militarine 含量分析
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番茄环纹斑点病毒核衣壳蛋白N的RT-LAMP检测方法的建立
《山东农业科学 》 2023 北大核心
摘要：番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)属正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus),严重影响番茄、辣椒等作物的产量及经济价值.本研究根据TZSV的核衣壳蛋白N的基因序列设计逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)反应引物,建立了TZSV的RT-LAMP检测方法.结果显示,该方法能够特异扩增TZSV,与侵染辣椒的番茄斑萎病毒和烟草花叶病毒不发生反应;RNA最低检测限为 0.01 pg/μL,灵敏度为普通逆转录PCR(RT-PCR)的 10 倍;田间样品检测应用结果表明,RT-LAMP扩增和可视化检测结果与RT-PCR一致.综上,本研究建立的RT-LAMP快速检测方法可有效应用于TZSV的田间检测.
关键词： 番茄环纹斑点病毒 核衣壳蛋白N 逆转录环介导等温扩增技术 检测
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云南龙陵地区产紫皮石斛和铁皮石斛中9种功能活性物质测定及鉴别研究
《现代食品 》 2023
摘要：建立了超声冰浴辅助提取,超高效液相色谱-串联质谱法同时测定紫皮石斛和铁皮石斛中9种活性化合物的分析方法.本方法快速简便、灵敏度高,样品经甲醇-水溶液冰浴下超声提取后,采用超高效液相色谱-串联质谱多反应监测模式正负离子同时扫描进行测定.该方法在 0.001~10.000 μg·mL-1 线性关系较好,定量限为0.025~0.250 mg·kg-1,平均加标回收率为 70.4%~79.2%,相对标准偏差为 4.27%~7.48%.PCA分析结果表明产自相同地区的紫皮石斛和铁皮石斛能够被有效鉴别.柚皮苷、芹菜素、圣草酚、香草酸和紫丁香苷特征活性化合物在紫皮石斛和铁皮石斛中的含量差异较大(P<0.01),且VIP值都大于1.柚皮苷在紫皮石斛中有检出,但在铁皮石斛中未检出,可以作为鉴别紫皮石斛和铁皮石斛的关键特征指标.
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云南省昭阳区和马龙区苹果营养品质的比较研究
《中国食物与营养 》 2023
摘要：目的:系统性分析和对比云南2个产区所产苹果主要营养成分,为云南苹果产业发展及相关产品研究提供科学依据.方法:以昭阳区和马龙区所产红富士苹果为原料,采用国家标准方法测定可溶性固形物、维生素C、硬度、矿质元素、总糖、总酸、可溶性糖的含量,运用高效液相色谱法测定有机酸组分及含量.结果:两地区苹果果实可溶性固形物、总糖、总酸含量相似,可溶性糖组分一致,含量无明显差异;有机酸和矿物质元素组分一致,含量有部分差异;维生素C、硬度数值有明显差异性.结论:两地区苹果营养品质、风味品质相似,果实表现稳定.
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一株蔗渣纤维素降解细菌的筛选与鉴定
《昆明学院学报 》 2023
摘要：制糖业是云南的主要产业之一，每年会产生大量的蔗渣.为了能有效地处理云南制糖业产生的蔗渣，并对其进行再次利用，研究团队从云南省昆明市筇竹寺森林公园采集土壤样品，分别用CMC刚果红培养基和以蔗渣作为唯一碳源的蔗渣培养基进行纤维素分解细菌的筛选，通过测定其在2种培养基上形成的水解透明圈和菌落直径的比值进行分析，再结合纤维素酶活力变化特征筛选获得一株能高效分解利用蔗渣纤维素的细菌QZS-1.该菌株整体为乳白色，边缘呈不规则锯齿状，上有花纹.经过革兰氏染色和芽孢染色确定为革兰氏阳性的芽孢杆菌.同源性比对显示，其与短小芽孢杆菌同源性达99.91%,最终鉴定为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）,在72 h时产酶活力达到最高，为17.217 U/mL.
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云南澜沧不同甘蔗品种植期宿根矮化病菌检测分析
《甘蔗糖业 》 2023
摘要：甘蔗宿根矮化病（Ratoon Stunting Disease,RSD）是严重影响蔗糖产业高质量发展的一种种传甘蔗病害。摸清不同甘蔗品种植期RSD的感染情况，是科学推广温水脱毒种苗，有效防控RSD的关键。本文对云南澜沧蔗区RSD的发生和分布进行了调查和田间采样，采用PCR法，对田间采集的124个样本进行RSD检测。结果表明：73个样本为阳性，阳性检出率58.87%，其中强阳性样品42个，占33.87%;15个主栽和主推品种均发病，发病率在28.57%～100%之间，以云引58号、粤糖82-882和德蔗09-84发病最重，发病率和强阳性率均高达100%，其次是粤糖93-159和粤糖00-236，发病率分别为90.00%和87.5%；植期上1～6年均不同程度发病，但无明显的规律性差异。本研究检测明确了澜沧蔗区不同品种植期RSD发生状况，为应用推广温水脱毒种苗、有效防控RSD提供了科学依据。
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不同木薯种质资源主要矿物质元素差异性分析
《热带作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为了解不同木薯种质资源矿物质元素含量,优选含量丰富的品种,为木薯的综合利用提供数据支撑,本文采用马弗炉法、原子吸收和原子荧光法分别对113份木薯种质资源灰分与矿物质元素含量进行测定,结果表明:矿物质元素Cr、Cu、Se含量均低于1 mg/kg(干重),Ca、Fe、K、Mg、Mn、Na、Zn含量分别为66.39~1609.81 mg/kg、4.35~38.93 mg/kg、1954.56~8762.78 mg/kg、149.04~1143.73 mg/kg、4.48~37.40 mg/kg、36.80~530.40 mg/kg、6.35~24.83 mg/kg.利用概率分级法将113份木薯种质资源灰分及矿物质元素含量分为5级,即极高、高、中、低和极低,并推荐极高品系作为基础亲本材料.在相关性分析中,灰分与Fe、Mg、Na、Zn含量具有较为显著的相关性,Ca含量与K、Mn含量呈极显著正相关,Ca含量与Mg、Na含量呈极显著负相关,Fe含量与Mg、Na、Zn含量成极显著正相关,K含量与Mn含量呈极显著正相关,与Na含量呈极显著负相关,Mg含量与Na、Zn含量呈极显著正相关,Zn含量与Mn、Na含量呈极显著正相关.Zn与各矿物质元素的吸收有较强的相互促进作用,Fe含量与Mg、Na含量有较强的相互促进作用,Ca含量与K、Mn的吸收有较强的促进作用,而Ca、K、Mn与Fe、Mg、Na的吸收可能存在一定的拮抗作用.结合主成分分析、聚类分析对不同木薯种质资源矿物质元素含量进行综合评价,得到特征值大于1的主成分2个,累计方差贡献率达61.707%.聚类分析可将113个木薯种质资源分为3类,根据矿物质元素含量差异可将不同木薯品种分为Na、Mg、Zn、Fe含量较高和Mn、Ca、K、Zn含量较高两大类,主成分综合评价中'274'50'571'521'417'等木薯种质资源得分较高.
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